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Elisa檢測(cè)中樣本OD值很低怎么辦?

  • 發(fā)布日期:2015-02-05      瀏覽次數(shù):2122
    • zui近在做ELISA實(shí)驗(yàn),購(gòu)買(mǎi)的是RD公司的ELISA試劑盒,*按照上面的說(shuō)明書(shū)步驟去做,發(fā)現(xiàn)做出來(lái)的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)還是可以的,但是樣本OD值很低,就是顯色很淡,不在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)范圍之內(nèi),而試劑盒zui低靈敏度是100PG/ML。所以我訂的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)zui高濃度是4000PG/ML,我的樣本是人血清,而購(gòu)買(mǎi)的試劑盒說(shuō)明書(shū)說(shuō)應(yīng)用于細(xì)胞血清的測(cè)定,用在人血清測(cè)定需要改變一些條件,但是本人摸索了一個(gè)多月,還是沒(méi)能做出來(lái)。我不知道問(wèn)題出在哪里,zui近試著把標(biāo)準(zhǔn)品放在人血清里檢測(cè),得到的OD值也是很低0.1左右,也不再曲線(xiàn)范圍。為什么會(huì)這樣呢?我用的是1%BSA+PBS作為稀釋劑,后面該用10%胎牛血清也是不行。所以問(wèn)問(wèn)給位同仁,我的問(wèn)題出現(xiàn)在哪里啊,人家做ELISA,很快就完成了,可我怎么那么做不出來(lái)呢?

      王同學(xué)可根據(jù)我司給出的建議:

      1. 試劑盒沒(méi)有質(zhì)量問(wèn)題,應(yīng)該從樣品及保存上找原因。
      2.你可以試試EDTA抗凝后取血漿檢測(cè)。
      3. 新鮮樣品檢測(cè)一下,將標(biāo)準(zhǔn)品稀釋后加入血清或血漿中檢測(cè)(也就是用血清進(jìn)一步稀釋標(biāo)準(zhǔn)品),觀察檢測(cè)結(jié)果,判斷是否是血淸中有未知物質(zhì)影響。
      4. 適當(dāng)延長(zhǎng)顯色時(shí)間。
      5. 更換酶標(biāo)儀,排除儀器原因。
      6. 咨詢(xún)RD的,幫助找原因。
      7. 更換廠(chǎng)家試劑盒,重新做。

      上海恒遠(yuǎn)生物專(zhuān)業(yè)代理Elisa試劑盒,含稅含運(yùn)費(fèi),*進(jìn)口試劑盒,RD試劑盒,我司全面提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),用于試劑盒生產(chǎn)的抗體全部美國(guó)進(jìn)口。