本公司經(jīng)營上萬種Elisa試劑盒，平時老師咨詢的產(chǎn)品說明書也大不相同，但是大家所不知道的是，其實Elisa試劑盒的操作步驟都是一樣的，做好操作步驟是一個產(chǎn)品試驗的關(guān)鍵存在，出一點差錯都是不行的，上海恒遠生物問您分享zui全面的試劑盒操作步驟。歡迎賞析！

一般正常的實驗操作步驟如下：
實驗開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解)；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時，應(yīng)對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準品溶液。
2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制)，酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止)。
7.        依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.        用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后立即進行檢測。