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[交流分享] ELISA實驗注意的問題

  • 發(fā)布日期:2016-06-22      瀏覽次數(shù):965
    • ELISA正常檢測工作,以下十八點十分重要,不能出現(xiàn)出錯,上海恒遠生物本章節(jié)交流分享為您具體探討這十八點注意問題。歡迎新手學習參考。
      1、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。 
      2、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。 
      3、實驗時,要使底物避光保存。 
      4、對結(jié)果有疑問的樣品要用其它方法進行確證 
      5、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正。 
      6、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時。 
      7、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確。 
      8、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。 
      9、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。 
      10、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。 
      11、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。 
      12、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。 
      13、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。 
      14、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。 
      15、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。 
      16、待檢樣品要澄清,否則會影響結(jié)果。 
      17、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。 
      18、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。 
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