ELISA實(shí)驗加樣防錯小竅門

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    ELISA加樣時的防錯小竅門

    （1）用一張寫滿字的紙，字越多越好，比如報紙，墊在下面，這樣，加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會變小，沒加的字正常，非常容易區(qū)分。

    （2）可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別。

    （3）在標(biāo)本加完后，再把加樣槍全壓下，使液面產(chǎn)生小氣泡，也可以加以區(qū)分。



    實(shí)驗常見問題解析

    問：做間接Elisa法測試小鼠血清中的IgE抗體，設(shè)空白對照、和陰性對照、陽性血清稀釋倍數(shù)為5千、1萬、10萬、20萬不等，用的是生物素標(biāo)記的羊抗鼠IgE抗體，和親和素的辣根過氧化物酶?？墒墙Y(jié)果除了空白對照孔沒有顏色外，其余各孔全有顏色，而且OD值都相差不大，為什么？

    答：可能原因如下： 
    （1） 水質(zhì)被金屬離子等污染；防止辦法盡量使用新鮮水或蒸餾水。
    （2） 洗滌不充分，樣品中其它成分殘留或酶殘留；防止辦法洗滌液應(yīng)注滿微孔，充分洗滌。
    （3） 移液頭重復(fù)使用，未洗凈或消毒不*； 防止辦法移液頭一次性使用。
    （4） 酶標(biāo)板靈敏度過高。
    （5） 一抗顯色時間的控制等等，關(guān)于ELISA的每一步都要注意才行。

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